SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
名称 |
规格 |
保存条件 |
清点 |
30%丙烯酰胺(29:1) |
100ml |
2-8度 |
|
1.5mol/LTris(pH8.8) |
100ml |
2-8度 |
|
1.0mol/LTris(pH6.8) |
15ml |
2-8度 |
|
过硫酸铵干粉 |
0.5g |
RT |
|
10%SDS |
5ml |
RT |
|
TEMED |
0.5ml |
RT |
|
产品简介
我们生产的SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒可用于配制SDS-PAGE凝胶。
本试剂盒约可配制25-50块常规大小的PAGE胶。
使用说明:
一,取5支1.5ml离心管,将过硫酸铵干粉分装成100mg/支,标记好备用。
二,凝胶制备:
1, 取一支称好的100mg过硫酸铵干粉,加入1ml蒸馏水,混匀,此配好的10%过硫酸铵溶液2-8度可保存一周。洗干净电泳玻璃板,夹好。
2, 根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。(可根据用量自行等比加减)
|
分离胶15% |
分离胶12% |
分离胶10% |
分离胶8% |
浓缩胶(5%) |
总体积 |
10ml |
10ml |
10ml |
10ml |
5ml |
30%丙烯酰胺(29:1) |
5ml |
4ml |
3.3ml |
2.7ml |
0.83ml |
1M Tris-HCL (PH6.8) |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.625ml |
1.5M Tris-HCL(PH8.8) |
2.5ml |
2.5ml |
2.5ml |
2.5ml |
0 |
10%SDS |
100ul |
100ul |
100ul |
100ul |
50ul |
ddH2O |
2.3ml |
3.3ml |
4.0ml |
4.6ml |
3.42ml |
10%过硫酸铵 |
100ul |
100ul |
100ul |
100ul |
75ul |
TEMED |
10ul |
10ul |
10ul |
10ul |
7.5ul |
注意:
1,TEMED和10%过硫酸铵最后加,在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在4℃有效期为一周(-20℃三个月),TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固,如温度过低,可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后,轻轻的加1ml ddH2O封上层,胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立刻插入梳子。浓缩胶凝固后,放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。
2,配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整30%丙烯酰胺的量(需要浓度×总体积/30%),最后用水补足总体积。
六,上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等溴酚兰电泳到合适的位置,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
|