普鲁士蓝染色液
(C0810)
产品简介:
普鲁士蓝染色又叫含铁血黄素染色,即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内或间质内,主要显示三价铁盐。普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁氰化钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物亚铁氰化铁(普鲁士蓝),所以该反应被称为普鲁士蓝反应。亚铁氰化铁是一种很稳定的化合物,在反应后可用中性红进行复染,形成对比。
染色液组成 |
100ml |
500ml |
2%亚铁氰化钾 |
100ml |
500ml |
2%盐酸 |
100ml |
500ml |
中性红染色液 |
100ml |
500ml |
操作步骤
1、标本处理:固定过的冰冻切片直接用水洗两到三次;石蜡切片常规脱蜡至水(参考流程: 二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min→100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。)
2、根据用量,取等量2%亚铁氰化钾和2%盐酸混匀,此染色液现配现用,染色15~30min。染色时间可根据结果调整。
3、蒸馏水充分冲洗1-2分钟。
4、中性红染色液染核2-5分钟,染色时间可根据结果调整。
5、自来水冲洗。
6、脱水,透明,中性树胶封片。(参考流程95%乙醇(I)min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min(一般可省去)→二甲苯(I)1min→二甲苯(Ⅱ)1min→中性树胶封固)
7、染色结果:阳性部位(含铁部位)为蓝色,其他如细胞核等为红色。
对于冰冻切片及细胞片,染色时间可适当减短。
注意事项:
1、组织固定常采用10%的中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。
2、普鲁士蓝染色液现配现用,不可存放。
3、整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品(泡染可以用塑料染色架),洗切片和容器时以蒸馏水为宜,只有最后全部染完可用自来水冲洗。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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