透析袋的选择:
透析袋所标孔隙是以球形分子标示的大概分子量,实际使用时,对于不同的分子,有很大的区别。并且这个东西是化工合成的,大家不要对他的分离精度抱太高的要求。
假如我们有一个大分子A,小分子B在一起,想把B去掉,把A留下。自然是选择空隙在A与B之间的了。说起来似乎很简单,比如对于一些蛋白或者大分子的脱盐,一般的透析袋都可以达到要求,象3500,7000或者14000。但如果A与B相差很近,比如,小蛋白,我想把10000的蛋白从两万的里面去掉,理论上用14000的就行了,但实际上,14000的透析袋不一定能让蛋白过去,因为这个一万的蛋白不能保证是球形,而且就算过得去,也有可能很慢很慢,慢到无法无天想象。因而在这种情况下,透析袋其实并不是最好的选择。就我的使用体会,蛋白脱盐,脱小分子,蛋白标记时去掉小的未标记物(如生物素,FITC等),平衡PH值等(实际还是透小离子),在这些应用上,透析袋还是可以的,而其他的,还真不好说。
透析袋的尺寸选择
这个不用多说,主要是根据自己样品的量来选。透析袋的标的大小尺寸是指半周长,稍稍估计一下就可以了。本个节省的原则,一个是节省透析袋,当然主要是节省自己的样品。
透析袋的处理:
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。